COVID-19 కోసం రోగనిర్ధారణ పరీక్షలు: ప్రస్తుత పద్ధతులు, పద్ధతులు మరియు భవిష్యత్తు యొక్క మూల్యాంకనం

అంతర్జాతీయ నిపుణుల సంస్థల సలహా మేరకు ప్రస్తుతం ఆచరణలో ఉన్న COVID-19 నిర్ధారణ కోసం ప్రయోగశాల పరీక్షలు సమీక్షించబడతాయి మరియు మూల్యాంకనం చేయబడతాయి.

COVID-19 వ్యాధి, ఇది వుహాన్ చైనాలో ఉద్భవించింది, ఇది ఇప్పటివరకు 208 కంటే ఎక్కువ దేశాలను ప్రభావితం చేసింది. మొత్తం ప్రపంచంలోని శాస్త్రీయ సమాజం అభివృద్ధి చెందడానికి గత కొన్ని నెలలుగా ఒక ముఖ్యమైన సవాలును ఎదుర్కొంది రోగనిర్ధారణ పరీక్షలు కోసం Covid -19 మహమ్మారిని సమర్థవంతంగా నిర్వహించడానికి మరియు నియంత్రించడానికి రోగులను మరియు అనుమానిత వ్యక్తులను పరీక్షించడానికి వ్యాధిని గుర్తించడం.

మేము COVID-19ని గుర్తించడానికి ఉపయోగించే ప్రస్తుత పద్ధతులు మరియు అభ్యాసాలను అంచనా వేయడానికి ముందు, COVID-19కి కారణమేమిటో మరియు ఈ వ్యాధి కోసం రోగులను పరీక్షించడానికి రోగనిర్ధారణ పరీక్షలను ఎలా అభివృద్ధి చేయాలో మనం ముందుగా అర్థం చేసుకుందాం. COVID-19 వ్యాధి సానుకూలంగా స్ట్రాండ్ చేయబడిన RNA వల్ల వస్తుంది వైరస్ అవి జూనోటిక్, అంటే అవి జంతువుల నుండి మానవులకు జాతుల అడ్డంకులను దాటగలవు మరియు మానవులలో జలుబు నుండి MERS మరియు SARS వంటి తీవ్రమైన వ్యాధుల వరకు అనారోగ్యానికి కారణమవుతాయి. COVID-19కి కారణమయ్యే వైరస్ ఇప్పుడు SARS-CoV-2 అని ఇంటర్నేషనల్ కమిటీ ఆఫ్ టాక్సానమీ ఆఫ్ వైరస్స్ (ICTV)చే పేరు పెట్టబడింది, ఎందుకంటే ఇది SARS వ్యాప్తికి (SARS-CoVs) కారణమైన వైరస్‌తో సమానంగా ఉంటుంది. COVID-19 వ్యాధి నిర్ధారణ పరీక్షను అనేక మార్గాల్లో అభివృద్ధి చేయవచ్చు.

SARS-CoV-2 వైరస్‌ను స్వయంగా గుర్తించగల రోగనిర్ధారణ పరీక్షను అభివృద్ధి చేయడం అనేది ప్రపంచవ్యాప్తంగా అత్యంత ప్రజాదరణ పొందిన మరియు ప్రస్తుతం అవలంబిస్తున్న పద్ధతి. ఈ పరీక్ష RT-రియల్ టైమ్ PCR (రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్-రియల్ టైమ్ పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్) ద్వారా రోగి నమూనాలోని వైరల్ జీనోమ్‌ను గుర్తించడంపై ఆధారపడి ఉంటుంది. ఇది రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ అని పిలువబడే ఎంజైమ్‌ని ఉపయోగించి వైరల్ RNAని DNAగా మార్చడంతోపాటు, నిర్దిష్ట ప్రైమర్‌ల సెట్‌ను మరియు ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్‌ను ఉపయోగించి DNAను విస్తరించడం, ఇది వైరల్ DNAపై నిర్దిష్ట ప్రాంతానికి కట్టుబడి, Taq పాలిమరేస్‌ని ఉపయోగించి మరియు ఫ్లోరోసెంట్ సిగ్నల్‌ను గుర్తించడం. ఈ పరీక్షలను NAATలు (న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ యాంప్లిఫికేషన్ టెస్ట్‌లు)గా సూచిస్తారు. కోవిడ్-19 వ్యాధి లక్షణాలను (ముఖ్యంగా 14-28 రోజుల పొదిగే కాలంలో) మరియు తరువాతి భాగంలో కనిపించని లక్షణరహిత రోగులలో కూడా, రోగి నమూనాలో న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ఉనికిని చాలా ముందుగానే గుర్తించడానికి ఈ సాంకేతికత చాలా ఉపయోగకరంగా ఉంటుంది. అలాగే వ్యాధి పూర్తి స్థాయిలో ఉన్నప్పుడు.

CDC (సెంటర్ ఫర్ డిసీజ్ కంట్రోల్), అట్లాంటా, USA మరియు WHO మార్గదర్శకాల (సెంటర్ ఫర్ డిసీజ్ కంట్రోల్) ఆధారంగా SARS-CoV-2ని గుర్తించడం కోసం NAAT ఆధారిత రోగనిర్ధారణ పరీక్షను అభివృద్ధి చేయడానికి ప్రపంచవ్యాప్తంగా వివిధ కంపెనీలు గత కొన్ని నెలలుగా సమయానికి వ్యతిరేకంగా రేసులో పనిచేస్తున్నాయి. 1, 2). SARS-CoV-2ని గుర్తించడం కోసం అత్యవసర ఉపయోగం కోసం ప్రపంచవ్యాప్తంగా ఉన్న ఆరోగ్య అధికారులు ఈ పరీక్షలను ఆమోదించారు. ఇప్పటివరకు లక్ష్యంగా చేసుకున్న వైరల్ జన్యువులలో తగిన సానుకూల మరియు ప్రతికూల నియంత్రణలతో పాటు N, E, S మరియు RdRP జన్యువులు ఉన్నాయి. అటువంటి పరీక్ష కోసం సేకరించాల్సిన రోగి నమూనాలు ఎగువ శ్వాసకోశం (నాసోఫారింజియల్ మరియు ఓరోఫారింజియల్ స్వాబ్) మరియు/లేదా దిగువ శ్వాసకోశం (కఫం మరియు/లేదా ఎండోట్రాషియల్ ఆస్పిరేట్ లేదా బ్రోంకోఅల్వియోలార్ లావేజ్) నుండి తీసుకోబడతాయి. అయినప్పటికీ, మలం మరియు రక్తంతో సహా ఇతర నమూనాలలో వైరస్ను గుర్తించడం కూడా సాధ్యమే. COVID-1 కోసం అనుమానిత కేస్ డెఫినిషన్‌ను కలిగి ఉన్న రోగుల నుండి, అవసరమైన అన్ని జాగ్రత్తలు తీసుకుంటూ మరియు బయో సేఫ్టీ పద్ధతులకు (WHO[19] నిర్దేశించిన మార్గదర్శకాల ప్రకారం) కట్టుబడి, తగిన పద్ధతిలో నమూనాలను త్వరితగతిన సేకరించాలి. రోగనిర్ధారణ కేంద్రానికి రవాణా చేయబడి, నమూనా సమగ్రతను నిర్ధారించడానికి ఒక పద్ధతిలో వేగంగా (BSL-2 లేదా సమానమైన సదుపాయంలో బయోసేఫ్టీ క్యాబినెట్‌లో RNA సంగ్రహించడం) అవసరం అయితే. మెరుగైన క్లినికల్ నిర్వహణ మరియు వ్యాప్తి నియంత్రణ కోసం ఇవన్నీ ప్రాధాన్యతా ప్రాతిపదికన నిర్వహించాలి.

ప్రపంచంలోని ప్రధాన రోగనిర్ధారణ సంస్థలచే అభివృద్ధి చేయబడిన వివిధ అందుబాటులో ఉన్న NAAT ఆధారిత పరీక్షల గుర్తింపు సమయం 45 నిమిషాల నుండి 3.5 గంటల వరకు ఉంటుంది. ఈ పరీక్షలను పాయింట్ ఆఫ్ కేర్ టెస్ట్‌లుగా మార్చడానికి మరియు ఫలితం యొక్క ఖచ్చితత్వాన్ని రాజీ పడకుండా వీలైనంత తక్కువ సమయంలో ఆశించిన ఫలితాలను సాధించడానికి, ఒక రోజులో చేయగలిగే పరీక్షల సంఖ్యను పెంచడానికి వివిధ మెరుగుదలలు చేయబడుతున్నాయి.

ఇతర రోగనిర్ధారణ పరీక్ష ఎంపికలు వేగవంతమైన రోగనిర్ధారణ పరీక్షలు (RDTలు) SARS-CoV-2 వైరస్ కణాల ఉపరితలంపై వ్యక్తీకరించబడిన వైరల్ యాంటిజెన్‌లు/ప్రోటీన్‌లను గుర్తించడం ద్వారా అవి హోస్ట్ కణాలలో పునరావృతమవుతాయి మరియు సంక్రమణకు ప్రతిస్పందనగా వ్యాధి లేదా హోస్ట్ యాంటీబాడీలను కలిగిస్తాయి; ఈ పరీక్ష COVID-19 (3) బారిన పడిన వ్యక్తుల రక్తంలో యాంటీబాడీస్ ఉనికిని గుర్తిస్తుంది.

వైరల్ యాంటిజెన్‌లను గుర్తించడానికి RDT యొక్క ఖచ్చితత్వం మరియు పునరుత్పత్తి అనేది అనారోగ్యం ప్రారంభమైన సమయం, నమూనాలో వైరస్ యొక్క ఏకాగ్రత, నమూనా యొక్క నాణ్యత మరియు ప్రాసెసింగ్ మరియు టెస్ట్ కిట్‌లలో ఉన్న రియాజెంట్‌ల సూత్రీకరణ వంటి అనేక అంశాలపై ఆధారపడి ఉంటుంది. ఈ వేరియబుల్స్ కారణంగా, ఈ పరీక్షల యొక్క సున్నితత్వం 34% నుండి 80% వరకు మారవచ్చు. ఈ ఎంపిక యొక్క ప్రధాన లోపం ఏమిటంటే, వైరస్ ప్రొటీన్‌లను గుర్తించడానికి వైరస్ దాని ప్రతిరూపం మరియు ఇన్ఫెక్టివ్ దశలో ఉండాలి.

అదేవిధంగా, హోస్ట్ యాంటీబాడీలను గుర్తించే పరీక్షలు యాంటీబాడీ ప్రతిస్పందన యొక్క బలంపై ఆధారపడి ఉంటాయి, ఇది వయస్సు, పోషకాహార స్థితి, వ్యాధి యొక్క తీవ్రత మరియు రోగనిరోధక వ్యవస్థను అణిచివేసే కొన్ని మందులు లేదా ఇన్ఫెక్షన్ల వంటి అంశాలపై ఆధారపడి ఉంటుంది. ఈ ఎంపిక యొక్క ప్రధాన లోపం ఏమిటంటే, SARS-CoV-2 వైరస్ సోకిన తర్వాత కొన్ని రోజుల నుండి వారాల వరకు ప్రతిరోధకాలు ఉత్పత్తి అవుతాయి మరియు పరీక్షను నిర్వహించడానికి చాలా కాలం వేచి ఉండాలి. దీనర్థం, హోస్ట్ యాంటీబాడీ ప్రతిస్పందన ఆధారంగా COVID-19 ఇన్‌ఫెక్షన్ నిర్ధారణ తరచుగా రికవరీ దశలో మాత్రమే సాధ్యమవుతుంది, వైద్యపరమైన జోక్యం లేదా వ్యాధి వ్యాప్తిని నిరోధించే అనేక అవకాశాలు ఇప్పటికే దాటిపోయాయి.

ప్రస్తుతం, పైన పేర్కొన్న RDTలు పరిశోధన సెట్టింగ్‌లో మాత్రమే ఆమోదించబడ్డాయి మరియు డేటా లేకపోవడం (3, 4) కారణంగా క్లినికల్ డయాగ్నసిస్ కోసం కాదు. COVID-19 కోసం మరింత ఎక్కువ ఎపిడెమియోలాజికల్ డేటా అందుబాటులోకి వచ్చినందున, సగటున తీసుకునే NAAT ఆధారిత పరీక్షలకు విరుద్ధంగా 10-30 నిమిషాల్లో ఫలితాలను ఇవ్వగలగడం వల్ల మరిన్ని RDTలు క్లినికల్ సెట్టింగ్‌లో పాయింట్ ఆఫ్ కేర్ టెస్ట్‌లుగా అభివృద్ధి చేయబడతాయి మరియు ఆమోదించబడతాయి. వ్యాధిని గుర్తించడానికి కొన్ని గంటలు.

***

ప్రస్తావనలు:
1. WHO, 2020. COVID-19 కోసం ప్రయోగశాల పరీక్షా వ్యూహం సిఫార్సులు. మధ్యంతర మార్గదర్శకత్వం. 21 మార్చి 2020. ఆన్‌లైన్‌లో ఇక్కడ అందుబాటులో ఉంది https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf 09 ఏప్రిల్ 2020న యాక్సెస్ చేయబడింది
2. CDC 2020. ప్రయోగశాలల సమాచారం. ప్రయోగశాలల కోసం మధ్యంతర మార్గదర్శకత్వం ఆన్‌లైన్‌లో అందుబాటులో ఉంది https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html 09 ఏప్రిల్ 2020న యాక్సెస్ చేయబడింది.
3. WHO, 2020. పాయింట్ ఆఫ్ కేర్ టెస్ట్‌ల ఉపయోగంపై సలహా. సైంటిఫిక్ బ్రీఫ్. 08 ఏప్రిల్ 2020. ఆన్‌లైన్‌లో ఇక్కడ అందుబాటులో ఉంది https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 09 ఏప్రిల్ 2020న యాక్సెస్ చేయబడింది.
4. ECDC, 2020. EU/EEAలో COVID-19 నిర్ధారణ కోసం రాపిడ్ టెస్ట్ సిట్యుయేషన్ యొక్క అవలోకనం. 01 ఏప్రిల్ 2020. వ్యాధి నివారణ మరియు నియంత్రణ కోసం యూరోపియన్ సెంటర్. ఆన్‌లైన్‌లో అందుబాటులో ఉంది https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea 09 ఏప్రిల్ 2020న యాక్సెస్ చేయబడింది

***